MYcrispr

Gene knockout, genome engineering, gene expression의 활성 혹은 억제, targeted DNA methylation, protein tagging, in vivo gene labeling,  MYlib sgRNA/crRNA library를 사용한 genetic screen에 적용 가능

 

sgRNA and pT7sgRNA

  • 서열이 검증된 plasmid DNA에서 전사된 고도로 정제된 RNA로 제작
  • 또는, 원하는 RNA 서열을 포함하고있는 오류가 없는 플라스미드 DNA 자체를 공급
  • sgRNA는 Streptococcus pyogenes Cas9 nuclease가 결합하는 3 ‘ trans-activating CRISPR RNA (tracr)에 연결된 5’ guide RNA로 구성
  • 18-20 nt 권장
  • 향상된 안정성과 in vivo 절단에 최적화

 

pU6sgRNA-GFP and pU6sgRNA-GFP-Puro

  • Human / mouse cells에서 sgRNA를 발현하기 위해 human U6 promoter와 함께 제공
  • GFP를 구동하는 CMV promoter 또는 GFP와 세포 분류 및 선택을 위한 puromycin expression을 포함
  • 각 plasmid는 여러 개의 U6-sgRNA cassettes를 삽입하여 여러 개의 sgRNA를 발현하도록 설계 가능
  • 이 plasmids는 Cas9 단백질 / mRNA / plasmid로 transfection되거나 Cas9-expressing cell line을 위해 transfection될 수 있음

 

Homology-Directed Repair Plasmids

  • Homology arms을 포함한 전체 DNA donor sequence를 사용하여 프로젝트에 적합한 custom DNA sequences를 합성
  • HDR sequences는 최대 10kbp까지 가능
Area of Application